期刊简介

本刊刊登与工程学相关的国内外医学技术、临床应用及其基础、新技术、新理论和高新技术开发成果,新药研制、成药二次开发,数学、物理在医学中的应用、新产品研制过程,国内外医用仪器设备的质量、性能评价和购置参考。文稿须具科学性、原创性、逻辑性及有效性、文字力求准确、精练、通顺。

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  • 杂志名称:中国医学工程杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国医药生物技术协会 卫生部肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1672-2019
  • 国内刊号:11-4983/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
中国医学工程杂志2006年第05期

tRNAval-CTE复合核酶真核表达载体构建

蒋永芳;龚国忠;许允;何艳;刘波

关键词:核酶, D型逆转录病毒胞浆转运信号序列CTE, 表达载体
摘要:目的 构建tRNAval-CTE复合核酶真核表达载体,为进一步研究打下基础.方法 用RT-PCR法扩增CTE cDNA;合成含tRNAval启动子和HCV 5-NCR区195位的核酶以及内切酶Kpn Ⅰ和EcoRⅤ序列,通过退火连接到pPUR质粒的BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位点之间,构建质粒pPHCV-Rz;用KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切后,将CTE cDNA定向插入表达载体pPHCV-Rz多克隆位点中,构建成重组表达质粒,并用酶切分析和序列测定进行了鉴定.结果 酶切鉴定和测序证实tRNAval启动子和HCV 5-NCR区195位的核酶基因以及CTE cDNA被正确克隆入真核表达载体pPUR.结论 tRNAval-CTE复合核酶真核表达载体的成功构建,为开展利用tR Naval-CTE复合核酶切割HCV RNA的研究奠定了基础.