期刊简介
本刊刊登与工程学相关的国内外医学技术、临床应用及其基础、新技术、新理论和高新技术开发成果，新药研制、成药二次开发，数学、物理在医学中的应用、新产品研制过程，国内外医用仪器设备的质量、性能评价和购置参考。文稿须具科学性、原创性、逻辑性及有效性、文字力求准确、精练、通顺。
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首页>中国医学工程杂志
- 杂志名称：中国医学工程杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国医药生物技术协会 卫生部肝胆肠外科研究中心
- 国际刊号：1672-2019
- 国内刊号：11-4983/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
RNA干扰抑制大鼠肝星状细胞CTGF表达的实验研究
姜晓笛；李智伟
关键词：结缔组织生长因子, RNA干扰, 肝星状细胞
摘要：目的 构建针对结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的RNA干扰重组质粒及其对照质粒,将其转染到体外培养的大鼠肝星状细胞(Hepatic Stellate Cells,HSC)中,进一步应用Real-time PCR方法检测CTGFmRNA 的表达,观察RNA干扰对大鼠肝星状细胞CTGF表达的抑制作用,为临床基因治疗提供依据.方法 ①利用pGCsi载体构建介导CTGF短发夹RNA(shRNA)表达的质粒重组体,并通过基因测序分析进行鉴定.②将构建成功的4组重组质粒转染大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),另设空白对照组,48 h后,共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)表达,分析转染效果.③检测CTGFmRNA表达水平,筛选出有效抑制CTGF表达的序列.④应用SPSS 17.0软件对数据进行方差分析.结果 成功构建了能表达CTGFshRNA的三组重组体pGCsi-CTGFshRNA.pGCsi-CTGFshRNA 成功转染到肝星状细胞中.与空白对照组相比,pGCsi-CTGFshRNA1组及pGCsi-CTGFshRNA2组细胞CTGFmRNA不 同程度下降,pGCsi-CTGFshRNA3组细胞及非特异性shRNA组mRNA表达水平无明显变化.结论 本实验成功构建了pGCsi重组质粒.重组质粒成功转染到大鼠肝星状细胞中.筛选出两条有效抑制CTGF基因表达的序列,pGCsi重组质粒能高效抑制大鼠肝星状细胞中CTGF的表达.
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